嗜肺巴斯德杆菌PCR试剂盒
产品内容:
成分 | 包装 |
2×Taq PCR Master Mix | 600ul |
超纯水(ddH2O) | 1ml |
嗜肺巴斯德杆菌 PCR 引物混合液 | 60ul |
嗜肺巴斯德杆菌 PCR 阳性对照(1×10E5 拷贝/μL) | 50ul |
使用手册 | 1份 |
注:为避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供专一的核酸片段作为阳性对照。
储存条件及有效期:
低温运输,-20℃保存,保存期限为 12 个月。
自备试剂:
样品 DNA
用自选方法提取纯化样品 DNA,本试剂盒跟市场上大多数核酸-提取试剂盒兼容。建议使用细菌基因组 DNA-提取试剂盒提取DNA。
应用范围:
常规PCR;T/A克隆;菌落PCR鉴定。
PCR过程:
1.变性
当反应混合物加热0.5至2分钟至94°C时,发生变性。
由于 DNA 两条链之间的氢键断裂,形成单链DNA。
单条 DNA链现在充当合成其他 DNA链的模板。
2.退火
持续约20至40秒,反应温度降至54至60℃。
在这种情况下,引物附着在模板 DNA的互补序列上。
引物序列是20-30个碱基长的单链 DNA或RNA片段。
它们充当 DNA生产的前体。
有两个引物-正向引物和反向引物一一两条分离的链以相反的方向延伸。
3.延伸
在此阶段温度升高至72至80摄氏度之间。
Taq聚合酶将碱基固定到引物的3'未端。结果,DNA从5'延伸至3'。
Taq聚合酶可以承受极-高的温度。结果产生双链DNA分子。
为了在短时间内获得多个感兴趣的 DNA序列,这三个过程需要进行20-40次。
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