培养基是适于细菌生长繁殖需要的各种营养物质人工配制而成的基质。按营养成分和用途不同,分为基础、合成、营养、鉴别、选择和厌氧。按物理形态分为固体、半固体和液体三类。根据细菌的种类和培养目的不同,可采用不同的培养基。
影响培养基灭菌效果的因素有哪些
1、营养物质的维持。
当微生物在湿热灭菌中被杀死时,营养成分也受到一定程度的破坏,尤其是氨基酸和维生素。比如在121℃下仅20分钟,59%的赖氨酸、精氨酸等碱性氨基酸被破坏,还有相当数量的蛋氨酸和色氨酸也被破坏。在热量的作用下,一些营养物质可能会因热量而相互反应,导致培养基中原有的营养物质发生变化,从而影响质量。
2.微生物的耐热性。
细菌孢子热阻大,灭菌所需时间取决于将细菌孢子减少到规定数量所需的时间。
3.pH值。
pH值对微生物的耐热性影响很大。当pH值在6.0-8.0之间时,微生物死亡的可能性最小。pH<6.0时,微生物容易死亡。此时H+很容易渗入微生物细胞,从而改变细胞的生理反应,促进细胞死亡。因此,酸碱度越低,所需的时间越短。
4.组成。
由油、糖和蛋白质组成的高浓度有机物会在细胞周围形成一层薄膜,影响热传导。然而,盐和色素的高浓度削弱了其耐热性,使杀菌更容易。例如,大肠杆菌在水中加热到60-65℃时死亡,在10%糖溶液中70℃加热4-6分钟,在30%糖溶液中加热30分钟。一般在含糖量高的时候,选择115°C30分钟;一般可在121℃下选择20分钟。
5.泡沫。
泡沫中的空气形成隔热层,使热量难以渗透进去,杀死杂菌。
6.颗粒。
小颗粒容易杀菌,大颗粒难杀菌。含有少量较大颗粒和粗纤维的介质可以通过粗过滤去除(这不应影响介质的质量)。结块会导致灭菌不*。
8.灭菌锅内的空气是否排出。
这是影响杀菌的关键点,也就是温度和压力的比例关系。同样的压力下,如果空气没有排出,也就是说不是纯蒸汽灭菌,此时的温度可能达不到目的要求,会严重影响灭菌效果。