荧光PCR试剂盒又可以分为探针和荧光染料两种方法。比较而言,探针杂交技术在原理上更为严格,所得数据更为;荧光染料技术则成本更为低廉,实验设计更为简便。在选择实验方案时要根据实验目的和对数据精度的要求来决定。
一般说来,应选用口碑较好的经过大量客户实验验证的荧光PCR试剂盒,因为只有选对了试剂盒才能够做成漂亮的实验结果来,特别是对于一些珍贵的样品更不能因为节约一些蝇头小利而毁了样品本身。荧光PCR试剂盒在研发之初就考虑到了一般科研环境中方方面面的影响,例如我们就光照强度、光照时间对本产品的影响做了严苛的实验论证,得到1ml本产品盛装于1.5ml离心管中放置在光照强度下可以保存12h,超过12h产品性能则会下降。
荧光PCR试剂盒这款试剂盒除了价格适中外,还主要有以下优点:
1、适用于荧光PCR试剂盒反应,可以快速、准确地对目的基因进行定量检测。
2、在荧光PCR试剂盒中,预先混有SybrGreen,PCR体系配制时只需入模板、引物、ddH2O即可,操作方便快捷。
3、含有更耐高温并持续稳定,可以维持更多的循环数,提供了选择循环数更大的空间。更大的Ct值选择范围就意味着可以支持微量目的基因检测,检测范围fM-nM。
4、反应的Buffer更适合,使反应的基线更水平,无荧光污染信号。使线性期更陡峭,避免了Ct值的无效浮动。使平台期更平直。也确保了引物与模板能够更特异地结合。
5、荧光PCR试剂盒更耐高温更足量,确保只要扩增反应在进行,目的DNA双链在增加,就有线性强度的荧光产生。
6、dNTPs更足量,确保反应有更高的平台期荧光信号。
7、Mg2+浓度更适合,确保线性期有爆发式的目的DNA片段合成,提高了线性期反应体系的扩增系数和线性期的长度。
8、更高的仪器适配性,荧光PCR试剂盒染料可以被各大主流仪器的激发光所激发,产生明亮的荧光信号,有利于仪器对信号的捕捉和处理。