一、简介
elisa酶联免疫试剂盒是酶免疫测定技术中应用很广的技术。其基本方法是将已知的抗原或抗体吸附在固相载体（聚苯乙烯微量反应板）表面，使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行，用洗涤法将液相中的游离成分洗除。
二、成分
试剂盒内包括以下试剂：
1.酶标板(96孔板)
2.血清检测抗体试剂(固定在小板上)
3.特异性标记兔抗人IgG辣根过氧化物酶(HRP)
4.HRP底物染色液
5.固定酶标板的NaCI-Pi缓冲液
6.去污液
7.色谱纯洗板缓冲液
三、样本类型
本试剂盒可检测不同种类的生物样本，包括：血清、血浆、组织抽提物、阳性参考样本、阴性对照样本等。不过首先要保证样本与试剂之间无相互干扰。
四、储藏
应于2-8℃的阴凉干燥处存放。如需长期贮存，应冷冻保存(-20℃或-80℃)。
五、试剂准备
1.酶标板制备：首先，在每个空白小孔板的每个孔中，添加50μL的PBS(0.01M)。然后将板放入一个旋转式混合器中，温和混合，管孔覆盖在对应的坑孔区域上，将坑孔以180度反转，然后在抽走液体后，再次将坑孔埋入缓冲液中，丢弃PBS。最后，将板于坑孔中添加100µl的固定抗体，每个备件(坑孔)尽可能多添加固定抗体。
2.样品制备：将样品与样品稀释液按照比例混合。
3.销量质控制备：将阳性参考样本与阴性对照样本准备好。
六、操作步骤
1.将酶标板每个小孔内填充50µL固定酶标记性抗体时，将板制备至2-8℃下存储20小时。
2.将液态样品溶于样品稀释液中，使样品达到适合检测的浓度。样品应避免过度稀释或过度浓缩。
3.然后，向每个小孔中加入50µl的稀释后的样品，以及50µl的阳性参考样本、50µl的阴性对照样本。
4.使用封板膜密封，并在37℃恒温箱中孵化60分钟。
5.丢弃所有的液体，并在试剂盒内水龙头下冲洗各个小孔以清除未被绑定的物质。
6.将200υl洗板缓冲液加入每个小孔中，用废液槽放置一段时间后，倒掉，重复此操作至少3次。
7.向每个小孔中加入50µl的HRP标记羊抗人IgG，孵化37℃下30分钟。
8.重复步骤6以清除未结合的物质。
9.将50µl的HRP底物添加到每个小孔，并在黑暗中置于室温静止15分钟。
10.停止反应，加入50µl停止液应用于每个孔中。
11.读取OD值测量各小孔校准曲线，计算样本的质量浓度。
七、注意事项
1.在开封后要存放于适当的保存条件下。
2.操作前检查所有步骤的操作方法和准备工作。
3.下一步操作前，须确保上一步的操作完成，并按照试剂盒内的实验步骤进行。
4.空白对照、阳性对照和含待测物品的样品需分别分管的水龙头下漂洗小孔。
5.如需要测量微量的样品，需使用微量孔板。
八、禁忌事项
1、本检测盒内禁止使用过期试剂。
2、禁止本试剂盒内的试剂与其他试剂或活性物质混合使用。
3、禁止口服或其他接触本试剂盒内的试剂。如发生皮肤敏感现象或可能影响人体内部健康，应进行医学干预。
九、适用范围
本检验盒被广泛运用于检测各类疾病，如传染病、自身免疫性疾病，肿瘤标志物、突变基因等。
十、质控
在正常操作中，该检测盒可保证准确性和可重复性。如果使用中发现问题，请先尝试实验操作流程，如仍然无法解决，可向生产厂家进行垂询。
以上就是对Elisa酶联免疫试剂盒的说明书，希望各位用户在使用本试剂盒时一定要加倍谨慎，按照说明书操作，以确保检测结果准确无误。
